AMYJET SCIENTIFIC · 质谱与蛋白组学样品前处理
质谱 / 蛋白组学 测序级酶 解决方案
蛋白组学质谱分析（Shotgun / DDA / DIA / TMT / 磷酸化组）的核心环节是可控、可重复、高覆盖的酶解。本方案以美国 Worthington（1947 年原厂，ISO 9001）测序级（Sequencing Grade）蛋白酶为主力，搭配核酸去除酶与蛋白组学样品制备工具，覆盖「裂解 → 酶解 → 除核酸 → 富集 → LC-MS」全链路，每个环节均提供可直接下单的货号与规格。
原厂标注 Sequencing Grade 的测序级酶
Worthington 原厂 · 批次可追溯 · CoA 齐全
Lys-C + Trypsin 双酶联用策略
现货 / 冷链 / 中文技术支持
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质谱级酶解的常用选择是测序级修饰胰蛋白酶 SequENZ®（化学修饰抗自溶、37°C 24h 活性稳定、SDS-PAGE 单带）；追求更高序列覆盖时，先以测序级 Lys-C 预消化、再以 SequENZ® 主消化（双酶策略）；膜蛋白 / 难溶蛋白可耐受尿素-胍变性环境；核酸污染样品以无核酸酶污染的 DNase I / RNase A 先行处理降背景。样品制备与磷酸化富集由 G-Biosciences、Tymora 补齐闭环。
分级如实标注仅原厂明确标注"测序级"的产品作测序级推介，其余如实标注为高纯/色谱纯化
全链路可下单裂解、定量、还原烷基化、酶解、脱盐、富集中文货号与规格一一对应
原厂正品批号全程追溯 · 活性指标原厂测定 · 冷链直达
1测序级核心酶 · Sequencing Grade
Worthington 明确标注 Sequencing Grade 的酶——质谱酶解主力。
🟡 测序级（原厂标注 Sequencing Grade）🔵 高纯（色谱纯化，未标测序级）🟢 常用（蛋白组学常规选型）
| 产品（Worthington） | 货号 / 规格 | 关键特性 | 质谱场景定位 |
|---|---|---|---|
| SequENZ® Trypsin, Modified 测序级 常用 · 金标准 |
WBC-LS02120 4×25 µg WBC-LS02122 4×100 µg WBC-LS02123 1 mg WBC-LS02150/52 液体 250 µg / 1 mg |
活性 ≥150 U/mg 蛋白（≥8,625 BAEE / 2,875 USP U/mg）。TPCK 处理抑制胰凝乳蛋白酶 + 化学修饰抑制自溶；37°C 孵育 24h 活性稳定；SDS-PAGE 单一条带；可耐受 0.1–2 M 尿素（0.5 M 胍内活性保持）。 | Shotgun / DDA / DIA / TMT 酶解首选，过夜酶解不出杂峰。复溶 1 mM HCl，酶:蛋白 1:20–1:100。 |
| Trypsin, Purified Sequencing Grade II 测序级 |
WBC-LS02115 4×25 µg WBC-LS02117 4×100 µg WBC-LS02119 1 mg WBC-LS02118 Bulk |
活性 ≥150 U/mg 蛋白。TPCK 处理（Kostka & Carpenter 法）抑制污染性胰凝乳蛋白酶；冻干粉，-20°C 干燥保存。 | 常规测序级消化与多肽图分析（Peptide Mapping）；适合大批量常规样品。 |
| Endoproteinase Lys-C 测序级 常用 · 双酶 |
WBC-LS02143 20 µg 蛋白 | 赖氨酸（Lys）C 端特异性内切；在尿素/胍等变性条件下活性保持（膜蛋白全解路线）。与胰蛋白酶切点互补。 | Lys-C → Trypsin 顺序双酶：先用 Lys-C 于 8 M 尿素中预消化，稀释后加 SequENZ®——显著提升疏水/膜蛋白覆盖度。 |
| Trypsin, TPCK Treated 高纯 较大包装 |
WBC-LS003740 100 mg WBC-LS003741 500 mg WBC-LS003744 1 g WBC-LS003742 大宗 20 g |
活性 ≥180 U/mg 蛋白（≥10,350 BAEE / 3,450 USP U/mg）。TPCK 处理经典款，提供至 20 g 大宗包装。 | Edman 测序 / 经典消化 / 大批量样品；单位成本更优。 |
2切点互补酶 · 提升序列覆盖度
单酶切不出全序列时，用不同切点的内切酶分段互补（multi-enzyme strategy）；或做C 端测序。均为 Worthington 色谱纯化高纯级别。
| 产品 | 货号 / 规格 | 特异性切点 | 典型用途 |
|---|---|---|---|
| Endoproteinase Glu-C （S. Aureus V8） 高纯 | WBC-LS003605 5 mg WBC-LS003608 1 mg | 谷氨酸（Glu）C 端（弱缓冲下同时切 Asp） | 与 Trypsin 覆盖互补；磷酸化/修饰位点定位。 |
| Clostripain Endoproteinase-Arg-C 高纯 | WBC-LS001641 1 mg WBC-LS001646 10 mg | 精氨酸（Arg）C 端 | Arg 富集蛋白；与 Lys-C/Trypsin 组合的高覆盖策略。 |
| Chymotrypsin, Alpha TLCK Treated 高纯 | WBC-LS001432 100 mg WBC-LS001434 1 g | 芳香族/疏水残基（Phe/Tyr/Trp/Leu）C 端；TLCK 处理去除胰蛋白酶活性 | 跨膜段/疏水肽段补充切割；拓扑与互作位点鉴定。 |
| Carboxypeptidase B / Y 高纯 | WBC-LS005304 CPB 50 mg WBC-LS009070 CPY 1 mg | C 端外切：CPB 切碱性 aa（Lys/Arg）；CPY 广谱 C 端 | C 端测序 / C 端截短鉴定；抗体药与重组蛋白 C 端完整性质控。 |
| Pepsin A, Purified Proteinase K, Recombinant 高纯 | WBC-LS003326 Pepsin 10 g WBC-LS004249 Proteinase K 100 mg | Pepsin：酸性（pH<4）广谱；Proteinase K：广谱强力 | 反相 LC 在线酸性酶解（bottom-up 备选路线）；质谱样品最终净化去杂蛋白。 |
3核酸去除酶 · 降背景提信噪比
细胞/组织裂解液富含 DNA/RNA——不处理会堵塞色谱柱、压低电离效率。用无交叉蛋白酶/核酸酶污染的纯化级别先行处理。
| 产品 | 货号 / 规格 | 关键特性 | 质谱场景定位 |
|---|---|---|---|
| DNase I RNase & Protease Free 高纯 | WBC-LS006331 2,500 U WBC-LS006333 10,000 U WBC-LS006343 50,000 U | 无 RNase / 蛋白酶交叉污染；另有即用液体（LS006342/344）。 | 质谱样品 DNA 去除，避免核酸高背景干扰肽段信号。 |
| RNase A DNase & Protease Free 高纯 | WBC-LS002132 5 mg WBC-LS003433 1 g | 无 DNase/蛋白酶交叉污染；另有重组无动物源版本可供选择。 | RNA 去除；真核样品核酸双去除方案。 |
| DNase I, Recombinant Animal Free · Bioprocess Grade 重组 · 无动物源 | WBC-LS006320 25,000 U WBC-LS006322 100,000 U WBC-LS006323 500,000 U | 重组生产、无动物源（AF）、Bioprocess 级——适合工艺放大与法规审计场景。 | 临床/工艺端蛋白样品前处理；规避 BSE/TSE 风险。 |
4质谱配套试剂 · 逐环节货号
酶解只是中间一环——裂解、还原烷基化、脱盐、定量每一步都得配齐。以下为 G-Biosciences 可下单货号。
| 环节 | 产品 | 货号 / 规格 | 作用与应用价值 |
|---|---|---|---|
| 裂解与 亚细胞分级 | PE LB™ for Mammalian Cell / Tissue | 786-180 500ml 786-181 500ml（组织） | 温和高效裂解，兼容下游酶解；细胞与组织分别优化配方。 |
| FOCUS™ Global Fractionation | 786-018 50 Preps | 全蛋白分级，降低样品复杂度 → 提升低丰度蛋白检出。 | |
| FOCUS™ Mitochondria Kit | 786-022 50 Preps | 线粒体靶向富集，膜蛋白/呼吸链研究适用。 | |
| Perfect-FOCUS™ / Fraction-FOCUS™ | 786-124 50 Preps 786-168 10 Preps | 沉淀/复溶与多组分分级，兼容双向电泳与 LC-MS。 | |
| 还原 与烷基化 （质谱必做） | FOCUS™ DTT [2M] | 786-227 5×1ml | 二硫键还原，打开蛋白结构提高酶解效率。 |
| FOCUS™ Protein Reduction-Alkylation 常用 | 786-231 100 Preps | 一步完成还原+烷基化（省一步、降误差），质谱样品前处理标配。 | |
| FOCUS™ Protein Alkylation | 786-232 100 Preps | 半胱氨酸烷基化，防止二硫键重排导致错切。 | |
| FOCUS™ Protein Solubilization Buffer | 786-PSB 50ml | 难溶蛋白（膜/包涵体）增溶，配合 Lys-C 变性酶解路线。 | |
| 酶解缓冲 | Trypsin Digestion Buffer 质谱级 | 786-242 100 Preps | MS Grade 专用酶解缓冲液，低背景、无干扰峰；与测序级胰酶搭配即用。 |
| 脱盐 与换液 | G-Trap™ Desalting Columns GT-600 / GT-100 / GT-1200 常用 | 786-1023 5×1ml 786-1025 5×1ml 786-1027 5×1ml 另备 5×5ml：786-1024/1026/1028 | 上机前最后一步：脱盐除去缓冲盐/去污剂，直接决定质谱基线与离子抑制；三种截留规格覆盖肽段到蛋白。 |
| 蛋白酶 抑制 | ProteaseArrest™ [100X] | 786-108 2ml 786-331 1ml（哺乳） 786-437 5ml | 裂解阶段保护目标蛋白；酶解到位后亦可终止反应，控制过度酶切。 |
| 蛋白定量 | BCA Protein Assay Bradford Reagent [5X] | 786-570 500 assays 786-573 250 assays（耐还原剂） BTNM-0018 500ml | 酶:蛋白比例精确控制的前提；耐还原剂版（786-573）适配含 DTT/TCEP 样品，避免定量失真。 |
| 除内毒素 | EndotoxinOUT™ Kit | 786-366 5×1ml kit 786-367 10ml resin | 重组蛋白/工艺样品除内毒素，满足体内/临床前样品要求。 |
| 质谱级酶 与固相酶解 | Trypsin (Porcine / Bovine) Mass Spectrometry Grade | 786-687 100µg（猪） 786-687B 100µg（牛） 786-690 5×100µg 786-693 5×200µg | 常规蛋白组学酶解的成熟选择；按项目需求与测序级产品搭配使用。 |
| SG-Chymotrypsin™ 测序级 | 786-13 2×5µg | 测序级胰凝乳蛋白酶，切芳香族/疏水残基，与胰酶切点互补提升覆盖度。 | |
| Immobilized Trypsin Immobilized Soybean Trypsin Inhibitor | 786-792 2ml resin 786-843 2ml resin | 固相酶解：速度快、酶自溶少、可重复使用，适合高通量/自动化前处理。 |
5磷酸化富集 · 翻译后修饰组学
酶解之后想看修饰位点，就得富集——磷酸化肽段不富集，质谱基本看不见。
| 品牌 | 产品体系 | 应用价值 |
|---|---|---|
| Tymora Analytical | 磷酸化肽段富集：TiO₂ 等金属氧化物亲和富集材料与试剂盒 PTM 前处理：翻译后修饰组学样品前处理全流程 |
酶解下游：pSer/pThr/pTyr 肽段选择性富集，用于激酶底物鉴定、信号通路磷酸化全景、药物靶点磷酸化标志物发现。 ※ 具体货号与规格请咨询，按需提供选型与报价 |
6对号入座 · 应用场景 → 选型组合
根据实验目的直接挑选组合，照单即可询价下单。
① 全蛋白组 Shotgun / DIA 鉴定
常规细胞/组织样品，追求深度鉴定与可重复性。
前处理：还原烷基化 786-231 + BCA 定量 786-570 → 酶解：SequENZ® WBC-LS02122 → 除核酸：WBC-LS006333 → 脱盐：786-1023
② 膜蛋白 / 难溶蛋白（高覆盖）
8 M 尿素全解路线，变性条件酶解。
增溶分级：786-PSB + FOCUS™ 786-018 → 双酶：Lys-C WBC-LS02143 → 稀释后 SequENZ® WBC-LS02122
③ 磷酸化 / 修饰蛋白组学
信号通路磷酸化全景、激酶底物鉴定。
链路：SequENZ® 酶解 WBC-LS02122 → Tymora TiO₂ 富集 → 脱盐 786-1023 → LC-MS/MS
④ 多肽图 / 序列覆盖验证
生物药、重组蛋白结构确证（Peptide Mapping）。
三酶联用：Trypsin WBC-LS02122 + Glu-C WBC-LS003608 + Chymotrypsin WBC-LS001432；配 MS 级缓冲液 786-242
⑤ C 端测序 / 截短鉴定
重组蛋白 C 端完整性 QC。
C 端外切：CPB WBC-LS005304 / CPY WBC-LS009070 时间梯度取样 → 脱盐 786-1023 → MS
⑥ 临床 / 工艺样品（无动物源）
法规审计、BSE/TSE 风险规避。
AF 链路：重组 DNase I AF WBC-LS006322 + 除内毒素 786-366 → SequENZ® WBC-LS02122
7全流程工作台 · 从样品到 LC-MS
每一步用什么、货号多少——照着下单即可。
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裂解与亚细胞分级
裂解 + 蛋白酶抑制剂 + 可选亚细胞分级（富集膜/线粒体低丰度蛋白）
G-Biosciences：PE LB™ 786-180/181 · ProteaseArrest™ 786-331 · FOCUS™ 786-018 / 786-0222
蛋白定量
精确定量才能控酶:蛋白比（1:20–1:100）；含 DTT 样品选耐还原剂版
G-Biosciences：BCA 786-570 · 耐还原剂版 786-573 · Bradford BTNM-00183
核酸去除（强烈建议）
DNase I + RNase A 处理：降粘稠度、防堵柱、提信噪比
Worthington：DNase I（RNase/Protease Free）WBC-LS006333 · RNase A WBC-LS0021324
还原烷基化（变性）
打开二硫键并封闭巯基；难溶蛋白用增溶缓冲液
G-Biosciences：FOCUS™ 还原烷基化 786-231 · DTT 786-227 · 增溶缓冲液 786-PSB5
测序级酶解（核心环节）
膜蛋白：8M 尿素下先 Lys-C 预消化 → 稀释后加 SequENZ® Trypsin，37°C 2–16h
Worthington：Lys-C WBC-LS02143 → SequENZ® Trypsin WBC-LS02122 · 酶解缓冲液（MS 级）786-2426
修饰肽段富集（可选）
磷酸化等低丰度修饰建议富集，否则易被高丰度肽段掩盖
Tymora：TiO₂ 磷酸化富集系列（货号与规格请咨询）7
脱盐 → LC-MS/MS 上机
除盐除去污剂，决定基线噪声与离子抑制；C 端/序列确认可用 CPB/Glu-C 二次验证
G-Biosciences：G-Trap™ 脱盐柱 786-1023/1025/1027 · Worthington：CPB WBC-LS005304 · Glu-C WBC-LS003608咨询与订购
艾美捷科技（AmyJet Scientific）· Worthington 中国区授权代理 · G-Biosciences 中国区独家代理
全流程方案支持：选型建议 · 酶解条件优化 · CoA / 批号追溯 · 冷链配送 · 大宗与 OEM 询盘
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官网welistluxury.com
说明
① 分级如实标注：标注"测序级（Sequencing Grade）"的为原厂明确标注产品；标注"质谱级（Mass Spectrometry Grade）"的为 G-Biosciences 对应产品；其余产品如实标注为"高纯 / 色谱纯化"。
② 商标：SequENZ® 归 Worthington Biochemical；FOCUS™、ProteaseArrest™、G-Trap™、EndotoxinOUT™、PE LB™、SG-Chymotrypsin™ 归 G-Biosciences。
③ 报价：本方案不列价格，报价以当日价格单为准，批量与大宗另议；部分规格为期货，交期以确认为准。
④ 文中货号与规格供选型参考，实际供货以订单确认为准；实验条件请参照产品说明书（manual）或咨询技术支持。
① 分级如实标注：标注"测序级（Sequencing Grade）"的为原厂明确标注产品；标注"质谱级（Mass Spectrometry Grade）"的为 G-Biosciences 对应产品；其余产品如实标注为"高纯 / 色谱纯化"。
② 商标：SequENZ® 归 Worthington Biochemical；FOCUS™、ProteaseArrest™、G-Trap™、EndotoxinOUT™、PE LB™、SG-Chymotrypsin™ 归 G-Biosciences。
③ 报价：本方案不列价格，报价以当日价格单为准，批量与大宗另议；部分规格为期货，交期以确认为准。
④ 文中货号与规格供选型参考，实际供货以订单确认为准；实验条件请参照产品说明书（manual）或咨询技术支持。
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