泛素化是真核细胞关键翻译后修饰，单泛素、多聚泛素链参与蛋白降解、DNA损伤修复、免疫信号传导等众多生理过程。泛素可通过7个不同赖氨酸位点形成异质性多聚泛素链，其中K48链介导蛋白酶体降解，K63链主要调控信号复合物组装。但去泛素化酶（DUB）会快速剪切泛素链，多聚泛素修饰具有高度动态性，给样本捕获与检测带来巨大挑战，传统富集手段存在亲和力不足、背景高、需要过表达标签泛素等诸多局限，由艾美捷代理LifeSensors推出的Magnetic TUBE 1高容量磁珠（货号UM501M）为解决上述痛点提供了成熟方案。

TUBEs（串联泛素结合元件）由串联重复的UBA泛素结合结构域构成，相比单一UBA结构域，对四聚泛素的亲和力达到纳摩尔级别，亲和力提升最高可达1000倍，优于普通泛素抗体。区别于传统实验手段，TUBEs不仅可以高效捕获多聚泛素化蛋白，还能够在裂解与保存过程中保护泛素链，抵御DUB以及蛋白酶体带来的降解，部分场景下可减少抑制剂的依赖。TUBE1可识别全部7种连接类型的多聚泛素链，属于泛素普适型捕获工具。UM501M将TUBE1直接偶联至磁性微球，实现一步法Pull?down，适配免疫印迹与泛素组质谱分析。

该产品为1?mL磁珠悬液，常规实验建议每1?2?mg总细胞裂解液使用100?μL磁珠悬液，储存缓冲液为pH7.2的PBS（含0.05%叠氮化钠），4℃保存，严禁冷冻、干燥以及高速离心，避免破坏磁珠性能。磁珠体系操作简便，借助磁力架即可完成捕获、洗涤，无需树脂离心沉降，有效降低非特异性背景，无需构建过表达标签泛素的细胞，直接从内源细胞、组织裂解物中富集生理状态下的多聚泛素修饰蛋白。

为保障富集效率，裂解液需要搭配配套抑制剂组合：PR?619广谱DUB可逆抑制剂、1,10?邻菲罗啉抑制JAMM金属型DUB，可选添加NEM抑制半胱氨酸DUB，同时加入蛋白酶抑制剂；注意避免裂解液中加入SDS、脱氧胆酸盐等强去垢剂，会显著降低富集回收率。实验流程上，磁珠经TBST充分平衡洗涤后，与裂解样本4℃摇床孵育，磁力架分离收集磁珠，多次洗涤后SDS上样缓冲液煮沸洗脱，即可开展WB或后续质谱鉴定。HeLa细胞样本验证结果显示，UM501M可以在不同蛋白上样量下稳定富集内源多聚泛素化蛋白。

泛素样本前处理是泛素化研究成败的关键。UM501M凭借高亲和力、磁珠便捷操作、可保护泛素链的多重优势，摆脱标签过表达的限制，真实还原细胞内多聚泛素修饰状态，广泛适用于细胞、组织样本的泛素化蛋白Pull?down、免疫印迹与泛素组蛋白质组学研究，是解析泛素调控网络的重要科研工具。本产品仅限科研使用，不可用于人或动物诊断与治疗。