Ubi-Trans™ UBA 6-UbcH 5 b TR-FRET检测试剂盒-Ubi-Trans™ UBA6-UbcH5b TR-FRET Assay Kit代理/参数/厂家-其它-开云·官方站线上登录平台入口

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背景资料: 泛素化是一个多步骤的过程，涉及E1（泛素激活酶），E2（泛素缀合酶）和E3（泛素连接酶）酶。在第一步中，E1-泛素硫酯键在泛素的C-末端甘氨酸羧基和E1酶活性位点的半胱氨酸之间在ATP依赖性反应中形成。接下来，E1酶将活化的泛素转移到E2酶的半胱氨酸残基上，通过酯交换形成E2-泛素硫酯连接的中间体。最后，E2酶在E3连接酶的帮助下将泛素转移到底物蛋白。UBA 6（泛素样修饰物激活酶6）是一种E1酶，可激活泛素，但也具有能够作用于FAT 10（也称为泛素D或人类白细胞抗原-F邻近转录物10）的独特特征。UBA 6以非常低的水平存在于大多数组织中，然而，它在树突状细胞成熟和高温应激期间上调。UBA 6可以将泛素转移到UbcH 5 b（也称为泛素缀合酶E2 D2，UBE 2D 2）。UbcH 5 b在某些癌症类型中过表达。它泛素化肿瘤抑制蛋白p53和p62，促进其降解。UbcH 5 b-p62复合物赋予三阴性乳腺癌细胞治疗抗性。UbcH 5 b还参与内吞介导的MHC（主要组织相容性复合体）I类分子的降解，并且在炎症性肠病中发现过表达。UBE 6对UbcH 5 b泛素化的抑制剂可能在癌症和自身免疫性疾病治疗中证明是有益的。

产品描述: Ubi-Trans™ UBA 6-UbcH 5 b TR-FRET检测试剂盒是一种均相、灵敏的TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）检测试剂盒，旨在测量Ub（泛素）向UbcH 5 b（泛素结合酶E2 D2）E2酶的UBA 6（泛素样修饰物激活酶6）依赖性转移。它利用铽（Tb）标记的供体和染料标记的链霉亲和素受体来完成TR-FRET配对。该试剂盒采用方便的384孔格式，含有足够的纯化UbcH 5 b、纯化UBA 6、生物素-泛素、抗His Tb（铽）标记供体、染料标记链霉亲和素受体和400个反应的测定缓冲液。
<img src="{{media url=“wysiwyg/82215.png”}}”alt="”width=“778”height=“300”/>图1：Ubi-Trans™ UBA 6-UbcH 5 b TR-FRET检测试剂盒示意图。
在ATP存在下，UBE 6（E1）将生物素结合的泛素转移到底物UbcH 5 b（E2）。Tb标记的抗His抗体与His标记的E2缀合蛋白结合，而染料标记的链霉亲和素受体与生物素-泛素结合。当泛素被E1转移到E2酶时，复合物形成。在没有泛素化的情况下，复合物不会形成，能量转移也不会发生。当E2被泛素化时，复合物形成，TR-FRET配对完成，并且观察到受体发射的增加。因此，TR-FRET信号与UBE 6活性成比例。